北京美德泰康生物科技有限公司

BEIJING MDTK BIOLOGY TECHNOLOGY CO.LTD

They invent.They imagine.They heal.

They explore.They create.They inspire.

They push the human race forward.

——“Think Different”

1975年，德国科学家Georges J. F. Kölhler和阿根廷/英国科学家César Milstein在英国《自然》杂志上发表了题为“分泌具有预定特异性抗体的融合细胞的持续培养”（Continuous cultures of fused cells secreting antibody of predefined specificity）的著名论文。他们大胆地将次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶（hypoxanthine guanosine phosphoribosyl transferase，HGPRT）缺陷型的骨髓瘤细胞株与经绵羊红细胞免疫的小鼠脾脏细胞进行融合，融合由仙台病毒介导。融合后的细胞在含有次黄嘌呤（hypoxanthine，H）、氨基喋呤（aminopterin，A）和胸腺嘧啶核苷（thymidine，T）的培养基（HAT）中生长进行选择。只有骨髓瘤细胞与脾细胞形成的杂交瘤细胞因得到分别来自亲本脾细胞的HGPRT和亲本 骨髓瘤细胞的连续继代特性，而在HAT培养基中存活下来。

单抗技术的问世，不仅带来了免疫学领域里的一次革命，而且它在生物医学科学的各个领域获得极广泛的应用，促进了众多学科的发展。

里程碑Ⅰ

项目方案设计

n  提供1-3个抗原序列供客户进行选择

根据客户提供信息（蛋白英文全称、序列信息、种属信息），使用Pre-Antigen蛋白抗原表位预测软件对目标序列进行抗原表位分析、同源分析以及抗体应用分析，制定项目方案，每个方案提供1-3个抗原供客户进行选择。

里程碑Ⅱ

抗原制备

n  多肽合成（常规多肽、磷酸化、甲基化、乙酰化修饰性多肽）

n  多肽偶联至载体蛋白（BSA、KLH、OVA）

n  蛋白类抗原进行表达纯化

n  客户提供抗原进行含量与纯度的质控

里程碑Ⅲ

动物免疫（ELISA效价＞16000）

n  初次免疫5只小鼠（Balb/c、ICR、昆明小鼠）；免疫佐剂（IFA弗氏非完全佐剂）

n  第一次加强免疫；免疫佐剂（CFA弗氏非完全佐剂）

n  第二次加强免疫；免疫佐剂（CFA弗氏非完全佐剂）

n  第三次加强免疫；免疫佐剂（CFA弗氏非完全佐剂）

n  血清效价评估：ELISA

里程碑Ⅳ

n  获得1000株杂交瘤细胞

n  第一次ELISA筛选

n  第二次ELISA筛选（特异性、交叉反应）

n  第三次ELISA筛选（抗体亚型鉴定）

n  扩大培养

n  细胞冻存

里程碑Ⅴ

客户筛选及亚克隆

n  收集5ml/株上清邮寄给客户进行鉴定

n  半固体培养基法亚克隆筛选

相关项目

n  细胞支原体检测

n  细胞无血清培养基（Serum Free）、化学成分限定培养基（Chemical Defend）驯化

n  细胞上清抗体制备

n  腹水抗体制备

n  抗体标记

n  抗体冻干

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